Anexo

1) Micrtomo:

Un micrtomo (del griego mikros, que significa "pequeo", y temnein, que significa "cortar") es un instrumento de corte que permite obtener rebanadas muy finas de material, conocidas como secciones. Los micrtomos son un instrumento importante de la microscopa porque permiten la preparacin de muestras para su observacin en microscopios de luz transmitida o de radiacin de electrones. Los micrtomos utilizan cuchillas de acero, vidrio o diamante, dependiendo del tipo de muestra que se est cortado en lonjas y del grosor deseado de las secciones del corte. Las cuchillas de acero se utilizan para preparar secciones de tejidos blandos animales o vegetales para estudios en el contexto de la histologa o de la industria como corcho, madera balsa y otros como arcillas hmedas, gelatinas densas, poliestireno expandido para microscopa de luz. Las cuchillas de vidrio se utilizan para preparar secciones para microscopa de luz y para cortar secciones muy delgadas para microscopa electrnica. Las cuchillas de diamante (de grado industrial) son utilizadas para cortar materiales duros como el hueso, los dientes y materia vegetal como, maderas duras, etc. Tanto para microscopa de luz como para microscopa electrnica.

Los rdenes de seccin de corte habituales en la microtoma son de 1 a 50 micras, pero varan segn el tipo de muestra y segn el microscopio en el que se desee observar la muestra. Debido a que los tejidos blandos son imposibles de cortar de manera uniforme, se procede siempre a su endurecimiento.

2) Hematoxilina:

La Hematoxilina es un compuesto que se obtiene de la planta leguminosa (Haematoxylum campechianum), conocida tambin con el nombre de palo de Campeche. Es un producto natural que al ser oxidado constituye una sustancia de color morado oscuro denominada hematena. Se utiliza en histologa para teir los componentes aninicos (cidos) de los tejidos, a los que da una coloracin violeta.

Tie intensamente los ncleos de las clulas, dado que estos contienen cidos nucleicos ricos en radicales cidos. Tal como se obtiene de la planta e incluso luego de sufrir el proceso de oxidacin, su capacidad de tincin es muy limitada. Por lo tanto, debe combinarse con iones metlicos, especialmente las sales de hierro (III) o aluminio (II), que actan como mordientes. Si bien la hematoxilina es una sal neutra, suele ser denominada como un colorante bsico, ya que el componente cromgeno reside en el complejo catinico (bsico) de la misma.

Es de notar que la tincin histolgica por hematoxilina no indica tanto la constitucin qumica de los componentes celulares, sino la densidad de cargas elctricas negativas de los mismos.

La hematoxilina puede combinarse junto con otros tintes, como el cido pcrico, y en conjunto son capaces de teir otras estructuras citoplasmticas.

3) Eosina:

La eosina es un colorante basfilo (tiene afinidad por las sustancias alcalinas), en forma de polvo rojo cristalino, de uso ampliamente extendido en el mbito industrial, desde la industria textil hasta el estudio biolgico e histolgico. Como curiosidad, tambin se utiliza en la coloracin de la gasolina. Las preparaciones de este compuesto son muy estables, por lo que perduran mucho tiempo si son almacenadas convenientemente. Por ello colorea componentes y orgnulos citoplasmticos, colgeno y bras musculares, pero no los ncleos (que son bsicamente cidos nucleicos y estn cargados negativamente). Aquellos componentes que se tien con eosina son conocidos como acidlos o eosinlos.

La coloracin resultante de la tincin con eosina es rosada-anaranjada para citoplasmas, y rojo intenso en el caso de los eritrocitos. Es fuertemente uorescente, aunque esta caracterstica es muy poco utilizada. La eosina es un colorante muy usado en tinciones de vitalidad. Al ser un colorante aninico(carga negativa) no penetra en el interior celular a no ser que la membrana sea permeable. Esto solo sucede en clulas muertas. Por tanto, en una tincin con eosina encontraremos clulas con el interior teido (muertas) y clulas solo teidas en su entorno (vivas).

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