健常者/アルツハイマー病患者 iPS 細胞から...(A246E変異) プラスミド...

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Transcript of 健常者/アルツハイマー病患者 iPS 細胞から...(A246E変異) プラスミド...

  • 健常者 /アルツハイマー病患者 iPS細胞から分化させた神経前駆細胞 / 大脳皮質ニューロン

    アクソルバイオサイエンス社

    掲載商品

    ■ iPS細胞由来のヒト神経前駆細胞  (健常者 /アルツハイマー病患者由来)

    ■ iPS細胞由来のヒト大脳皮質ニューロン■ 神経関連細胞の維持および分化に ご使用頂ける無血清培地

    アルツハイマー病の研究にAxol Bioscience 社では、健常者やアルツハイマー病患者由来の iPS細胞から分化させた神経前駆細胞や大脳皮質ニューロンを販売しています。細胞は、機能性のある様々な皮質ニューロンに分化します。

  • 健常者およびアルツハイマー病患者由来細胞から iPS 細胞を分化させたヒト神経前駆細胞です。

    iPS 細胞から分化させた細胞のため、ばらつきが少なく高純度です。

    神経前駆細胞の典型的なマーカーである Foxg1 や Pax6 などの発現を確認しています(図 1)。

    複数のドナー由来の細胞があり、またアルツハイマー病患者由来細胞については異なる遺伝子変異を有する細胞があるた

    め、試験結果をドナー間で比較できます。

    AxolTM Human Neural Progenitor Cells(hNPCs)

    ― iPS細胞由来のヒト神経前駆細胞 ―

    ●健常者由来 ヒト神経前駆細胞品名 ドナー性別 iPS 細胞の由来 再プログラミング方法 品番 包装 希望販売価格

    AxolTM hNPCs 男 新生児  Episomal 型 AX0011 1vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM hNPCs 男 新生児 Episomal 型 AX0013 1vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM hNPCs 女 新生児 Episomal 型 AX0014 1vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM hNPCs 男 新生児 Episomal 型 AX0015 1vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM hNPCs 女 新生児 Episom型 AX0016 1vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    Axol Bioscience Ltd.   メーカー略号:AXO

    図 1 hNPCs を培養し、各種神経皮質幹細胞や前駆細胞に特異的なマーカーの抗体を用いて、蛍光染色をおこなった。特異的なマーカーを発現しながら、神経管様のロゼット状の構造を取っている。

    お問い合わせ先:TEL. 03-5632-9610  FAX. 03-5632-9619  E-mail. [email protected]

    健常者 /アルツハイマー病患者 iPS細胞から分化させた神経前駆細胞 /大脳皮質ニューロン

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    cells

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    C.

    ●アルツハイマー病患者由来 ヒト神経前駆細胞

    品名 Genotype ドナー年齢 iPS 細胞の由来 再プログラミング方法 品番 包装 希望販売価格

    AxolTM AD hNPCs APOE4  87 歳 皮膚線維芽細胞 Episomal 型 AX0111 1vial ¥102,000 ホモ接合体 プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM AD hNPCs Presenilin-1 38 歳 皮膚線維芽細胞 Episomal 型 AX0112 1vial ¥102,000 (L286V 変異) プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM AD hNPCs Presenilin-1 53 歳 皮膚線維芽細胞 Episomal 型 AX0113 1vial ¥102,000 (M146L 変異) プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM AD hNPCs Presenilin-1 31 歳 皮膚線維芽細胞 Episomal 型 AX0114 1vial ¥102,000 (A246E 変異) プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM AD hNPCs Presenilin-2 81 歳 皮膚線維芽細胞 Episomal 型 AX0115 1vial ¥102,000 (N141I) プラスミド (2×106 cells)

    Axol Bioscience Ltd.   メーカー略号:AXO

    ~ アルツハイマー病患者の発病機序の解明や薬物候補物の探索に有用です ~

    ~ 神経ネットワーク形成やシグナル伝達、創薬研究等に有用です ~

  • 健常者由来細胞から iPS 細胞を分化させた、ヒト大脳皮質ニューロンです。

    iPS 細胞から分化させた細胞のため、ばらつきが少なく高品質です。

    大脳皮質ニューロンの典型的なマーカーである Tbr1、Ctip2、Brn2、CuX2 などの発現を確認しています(図 2)。

    電気的活性を持つ機能性シナプスや、神経回路を形成できる皮質ニューロンに分化させる事ができます(図 3)。

    AxolTM Human Cerebral Cortical Neuron(hCCNs)

    ― iPS細胞由来のヒト大脳皮質ニューロン ―

    ●健常者由来 ヒト大脳皮質ニューロン品名 ドナー性別 iPS 細胞の由来 再プログラミング方法 品番 包装 希望販売価格

    AxolTM hCCNs 男 新生児  Episomal 型 AX0021F 1 vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM hCCNs 男 新生児  Episomal 型 AX0023F 1 vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM hCCNs 女 新生児  Episomal 型 AX0024F 1 vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM hCCNs 男 新生児  Episomal 型 AX0025F 1 vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    AxolTM hCCNs 女 新生児  Episomal 型 AX0026F 1 vial ¥102,000 臍帯血中の CD34+細胞 プラスミド (2×106 cells)

    Axol Bioscience Ltd.   メーカー略号:AXO

    図 2 hCCNs を培養し、大脳皮質に特異的なマーカーの抗体を用いて、蛍光染色をおこなった。

    http://www.cosmobio.co.jp

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    40-45 DAP25-30 DAP10-15 DAP

    All cellspatched

    Cellspiking

    A.10-15 days 25-30 days 40-45 days

    0 mV

    400 ms8 p

    A

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    10 8 6 4 2 00

    Spike width (ms)

    D.

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    + CNQX

    25-30 DAP

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    No EPSCs

    No EPSCs

    200 ms5 p

    A

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    F.

    40-45 DAP

    IPSCs

    + gabazine

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    + CNQX

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    200 ms

    20 p

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    40-45 DAP25-30 DAP10-15 DAP

    All cellspatched

    Cellspiking

    B.10-15 DAP 25-30 DAP 40-45 DAP

    0 mV

    400 ms8 p

    A

    200 ms

    20 m

    V

    40-45 DAP25-30 DAP10-15 DAP

    Sp

    ike

    amp

    litud

    e (m

    V)

    80

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    10 8 6 4 2 00

    Spike width (ms)

    C. D.

    E.

    + CNQX

    25-30 DAP

    10-15 DAP

    No EPSCs

    No EPSCs

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    A

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    B.

    40-45 days

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    + CNQX

    100 ms10

    pA

    10 ms20

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    200 ms

    20 p

    Aat 2 µM

    at 10 µM

    A. 各培養日数(播種後 10 ~ 15 日、25 ~ 30 日、40 ~ 45 日)での代表的な活動電位の測定記録。培養日数の経過と共に電流の振幅が増加しているのが確認できる。

    B. 播種後 40 ~ 45 日培養した成熟ニューロンの興奮性シナプス後電流 (EPSCs) と抑制性シナプス後電流 (IPSCs) の測定記録。成熟ニューロンのシナプス後電流は、CNQX(非 NMDA型グルタミン酸受容体のアンタゴニスト)、もしくは gabazine(GABAA 受容体のアンタゴニスト)の投与により抑制される事が確認できる。

    データ提供:University of Cambridge, UK Neuronal Oscillations Group (Ole Paulsen’ s Lab)

    図 3 whole-cell パッチクランプ法で測定した AxolTM hNPCs 由来の分化ニューロンの電気生理学的特徴

  • AxolTM hNPCs / AxolTM hCCNs の維持および分化にご使用頂ける

    無血清培地です。

    AxolTM Neural Maintenance Medium

    ― 神経関連細胞維持・分化用 無血清培地 ―

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    細胞剥離溶液 Accutase® ( アキュターゼ )

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    AxolTM Neural Maintenance Medium AX0031 1 kit ¥53,000 (125 mL x 4)

    Axol Bioscience Ltd.   メーカー略号:AXO

    品名 品番 包装 希望販売価格

    Accutase® GSP-0101-100 100 mL ¥3,800 Global Cell Solutions Inc.   メーカー略号:GLO

    Accutase®( アキュターゼ ) はトリプシン /EDTA の代替となる細胞剥離 /分散溶液で、高い細胞生存率を示します。接着細胞の剥離や、組織から初代培養細胞を分離、分散する事が出来ます。プロテアーゼとコラゲナーゼがバランス良く調製された溶液で、穏やかかつ迅速に作用します。哺乳動物細胞や微生物由来の物質は含んでおらず、アキュターゼを用いて剥離・分散させた細胞は、細胞増殖アッセイやフローサイトメトリーなど様々なアプリケーションに使用できます。

    使用実績のある細胞の一例● ヒト ES 細胞(human embryonic stem cells) ● ヒト間葉系幹細胞 (human mesenchymal stem cells) ● ヒト神経幹細胞(human neural stem cells) ● 線維芽細胞 ● ケラチノサイト ● 血管内皮細胞 ● 血管平滑筋細胞 ● 肝前駆細胞 ● HEK293 細胞 ● A375 細胞 ● BHK 細胞 ● CHO細胞 ● HeLa 細胞

    1. Stuart M Chambers et al. Highly efficient neural conversion of human ES and iPS cells by dual inhibition of SMAD signaling. Nat Biotech. 27, 275-280 (2009)

    2. Yichen Shi et al. Human cerebral cortex development from pluripotent stem cells to functional excitatory synapses. Nat Neuroscience 15, 477‒486 (2012)

    3. Claire Boissart et al. Differentiation from human pluripotent stem cells of cortical neurons of the superficial layers amenable to psychiatric disease modeling and high-throughput drug screening. Transl Psychiatry (2013) 3, e294; doi:10.1038/tp.2013.71

    Axol 社 参考文献

    Accutase® は Innovative Cell Technologies, Inc. の登録商標です。

    健常者 /アルツハイマー病患者 iPS細胞から分化させた神経前駆細胞 /大脳皮質ニューロン

     ● 希望販売価格 ・・・ 「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は2014年3月1日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。 ● 使 用 範 囲 ・・・ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。 人や動物の医療用・臨床診断用・食品用等としては使用しないよう、十分ご注意ください。

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