Hodowle komórkowe Komórki i reagenty Obrazowanie...
Transcript of Hodowle komórkowe Komórki i reagenty Obrazowanie...
Immunofluorescencja
Chemotaksja
Angiogeneza
Obrazowanie żywych komórek
Migracja komórek
Testy w warunkach przepływu
Hodowle komórkowe
Komórki i reagenty
W celu pobrania katalogów prosimy odwiedzić stronę:
2
Płyt
ki d
o ob
razo
wan
ia d
o uż
ytku
w k
ażdy
m la
bor
ator
ium
Szeroka gama płytek do obrazowania
Znajdź idealną płytkę, najlepiej dopasowaną do Twoich badań!
• Bardzo cienkie dno płytki o grubości szkiełka nakrywkowego umożliwia stosowanie mikroskopii wysokiej rozdzielczości
• Bardzo dobry wzrost komórek na powierzchni ibiTreat
• Potwierdzona mechaniczna i chemiczna stabilność hodowli
• Duża dowolność rozmiarów i powleczeń płytek
Mikropłytki 2, 4, 8 - komorowe• Płytki zapewniające optymalny wzrost komórek
i wysokiej rozdzielczości mikroskopię
Mikropłytka VI 0.4 | Mikropłytka VI 0.1
• Płytki 6-kanałowe do immunofluorescencji i jednoczesnych testów w warunkach przepływu
Mikroszalki• Szalki do hodowli komórkowych z pokrywką do
mikroskopii wysokiej rozdzielczości
NOWOŚĆ: Mikropłytki 2-, i 4 - komorowe Ph+ • Płytki z dodatkową, pośrednią wstawką
zapewniające lepszy kontrast fazowy oraz brak menisku
Informacje dot. zamówienia:
ibiTreat – standardowe podłoże do obrazowania żywych komórek
100 xSzkiełko nakrywkowe do obserwacji w wysokiej rozdzielczości
80286µ-Slide 2 well, ibiTreat
80426µ-Slide 4 well, ibiTreat
80826µ-Slide 8 well, ibiTreat
80296µ-Slide 2 well Ph+, ibiTreat
80446µ-Slide 4 well Ph+, ibiTreat
81156µ-Dish 35 mm, high, ibiTreat
81166µ-Dish 35 mm, high Grid -500, ibiTreat
81136µ-Dish 50 mm, low, ibiTreat
81191µ-Dish 35 mm, high ESS, uncoated elastic surface
80606µ-Slide VI 0.4, ibiTreat
3
96 - komorowa płytka do angiogenezy
Przeznaczona do badań o wysokiej przepustowości.
Mikropłytki wielodołkowe
Czarne, 24 -, 96 - i 384 - dołkowe płytki z płaskim i przezroczystym dnem do badań o wysokiej przepustowości.
Płytki wielodołkow
e
Lepka mikropłytka do chemotaksji 3D
Bez podstawy, z samoprzylepnym spodem, do którego mogą być zamocowane własne substraty.
Mikropłytka do chemotaksji 2D
Wycofana z użytku, zastąpiona mikropłytką do chemotaksji 3D.
Mikropłytka do chemotaksji 3D
Obserwacja ukierunkowanego ruchu komórek przylegających i nieprzylegających, dostępna także w wersji lepkiej.
Mikropłytka do chemotaksji 3w1
Płytka do wykorzystania trzech różnych płynów łączących się w jednym, wspólnym kanale.
Płytki do chemotaksji
Mikropłytka typ I
Płytka z przykrywką do obserwacji komórek znajdujących się w kanale.
Mikropłytki typu Luer
Płytki o różnej wysokości, objętości i pokryciach kanałów, wykorzystywane w testach w warunkach przepływu, dostępne również w formie lepkiej.
Mikropłytka typ III
3 - kanałowa płytka do badania przepływu i immunofluorescencji przy minimalnym zużyciu reagentów.
Mikropłytka Y - kształtna
Przepływ poprzez rozwidlający się kanał w celu symulacji przepływu krwi w naczyniach krwionośnych.
Płytki kanałowe
Lepka 6 - kanałowa mikropłytka
Bez podstawy, z samoprzylepnym spodem, do którego mogą być zamocowane własne substraty.
Inserty do hodowli
Silikonowe inserty z przegrodą między dwiema komorami, idealne do testów gojenia ran i nieukierunkowanej migracji komórek.
Płytka 12 - komorowa
Płytka ze zdejmowalnym, silikonowym, 12 - komorowym insertem do hodowli komórkowych, barwienia i przechowywania preparatów.
Inserty 4 - komorowe
Silikonowe 4 - komorowe inserty z przegrodami do hodowli i obrazowania żywych komórek przy mniejszym zużyciu reagentów.
Inserty
Lepka mikropłytka 8 - komorowa
Bez podstawy, z samoprzylepnym spodem, do którego mogą być zamocowane własne substraty.
Mikropłytka do angiogenezy
Obserwacja procesu angiogenezy i tworzenia się rurkowatych struktur nowych naczyń krwionośnych. Odpowiednie do kultur 2D i 3D.
Mikropłytka 18 - komorowa, płaska
Do testowania matryc.
Płytki otwarte
www.ibidi.com
BEZPŁATNE PRÓBKI ibidi
Zamów bezpłatne próbki na
Przetestuj mikropłytki i mikroszalki ibidi w swoim laboratorium.
Mikropłytka 2 x 9 - komorowa
Odpowiednia do ko-kultywacji i obserwacji pod mikroskopem.
4
Komórki i reagenty
FUSE - IT – transport białek i innych cząsteczek przez błonę komórkową
• Szybkie rezultaty w ciągu kilku minut
• 80 - 100% wydajności
• Niezależny od rodzaju komórek, ich gęstości i etapu rozwoju
• Odpowiedni do rozpuszczalników, białek, tłuszczy
LifeAct™ – marker do wizualizacji fibrylarnych aktyn w żywych komórkach
• Znakomite obrazowanie aktyny występującej w postaci fibrylarnej
• Obrazowanie funkcjonalności i dynamiki aktyny
• Dostępny w formie plazmidów, adenowirusów, wektorów lentiwirusowych oraz stabilnej linii komórkowej HT-1080
Reagenty do hodowli komórkowych
• ibidi Freezing Medium: bezsurowicze medium do zamrażania komórek gwarantujące bardzo wysoki poziom odzysku
• ibidi Mounting Medium: zachowuje wybarwione próbki przez miesiące
• ibidi Anti-Evaporation Oil: zapobiega nadmiernemu odparowywaniu reagentów
Fuse-ItNośnik
fosfolipidowy
Fuzjabłon
Cytoplazma
Jądro
Torpedo - reagent do transfekcji
• Wysoka zgodność biologiczna oraz niska cytotoksyczność, do stosowania w obrazowaniu żywych komórek
• Zoptymalizowana wydajność transfekcji w badaniach mikroskopowych
12
6
39
Informacje dot. zamówienia:
60101Plasmid p CMV LifeAct- TagGFP2
60121Adenovirus rAV CMV-LifeAct- TagGFP2
60141Lentivirus rLV Ubi-LifeAct-TagGFP2
40101HT-1080 LifeAct-TagGFP2 cells
60610Torpedo DNA Transfection Reagent
60620Torpedo siRNA Transfection Reagent
60200Fuse-It green
60220Fuse-It P
80021ibidi Freezing Medium Classic
50051ibidi Anti-Evaporation Oil
5
100 x
Immunofluorescencja
• Szybkie i łatwe przygotowanie próbek
• Homogeniczna hodowla komórkowa
• Zużycie małej ilości komórek i reagentów
• Obrazy mikroskopowe o wysokiej rozdzielczości
Informacje dot. zamówienia:
Płytki ALL IN ONE redukują liczbę czynności niezbędnych do wybarwienia komórek.
Komórki ludzkie śródbłonka żyły pępowinowej HUVEC w warunkach przepływu na Mikropłytce I 0.4 Luer
Komórki psiej nerki Madin Darby na Mikropłytce VI 0.4
Mikropłytki 12 - komorowe z usuwalnymi silikonowymi ściankami pozwalają na standardowe barwienie z wykorzystaniem podstawowych technik.
Przykładowe zastosowania:
www.ibidi.com
Zobacz krok po kroku jak pracować z płytkami ibidi:
Immunofluorescence Using the µ-Slide VI (MV 18),
na www.ibidi.com.
ibidi MOVIE
1. Posianie komórek
1. Hodowla komórek
2. Utrwalanie 3. Barwienie 4. Obrazowanie
2. Inkubacja 3. Usunięcie silikonowego insertu
4. Barwienie i utrwalenie
5. Przechowywanie
80606µ-Slide VI 0.4, ibiTreat
80286µ-Slide 2 well, ibiTreat
80426µ-Slide 4 well, ibiTreat
80826µ-Slide 8 well, ibiTreat
80296µ-Slide 2 well Ph+, ibiTreat
80446µ-Slide 4 well Ph+, ibiTreat
80406µ-Dish 35 mm, high micro-Insert 4 well
81201µ-Chamber 12 well
50001ibidi Mounting Medium
BEZPŁATNE PRÓBKI ibidi
Zamów bezpłatne próbki na
Przetestuj mikropłytki i mikroszalki ibidi w swoim laboratorium.
6
Systemy podtrzymywania stałej temperatury i inkubacji żywych komórek podczas obrazowania
• Doskonała iluminacja bez kondensacji
• Bezpieczna inkubacja komórek podczas pracy z mikroskopem
• Kompatybilny z wszystkimi rodzajami płytek do hodowli komórkowych
0 h
2 h
6 h
Obserwacja tworzenia się rurkowatych struktur nowych naczyń krwionośnych
Testy chemotaktyczne 2D i 3D
Migracja dendrytów zgodnie z chemotaktycznym gradientem
Komórki HUVEC na płytkach do angiogenezy pokrytych matriżelem
Testy migracji i proliferacji
Zbliżenie na szczelinę wolną od komórek powstałą przy pomocy insertów
0 h
12 h
24 h
Przykłady eksperymentów:
• Niezależnie kontrolowane podgrzewanie szklanej pokrywy systemu do utrzymywania stałej temperatury i inkubacji komórek rozwiązuje problem kondensacji pojawiający się podczas ich obserwacji
Podgrzewana podstawa
podgrzewana pokrywaRozwiązanie ibidi:
40 °C
37 °C
Podgrzewana podstawa
34 °C
37 °C
Niepodgrzewana pokrywa
Podgrzewana podstawa
podgrzewana pokrywaRozwiązanie ibidi:
40 °C
37 °C
Podgrzewana podstawa
34 °C
37 °C
Niepodgrzewana pokrywa
Kontrast fazowy bez kondensacji Kontrast fazowy z kondensacją
Informacje dot. zamówienia:
10918ibidi Heating System, Universal Fit
10926ibidi Heating System, Multi-Well Plates
74001ibidi OPAL Optical O2 Measurement System
11920ibidi Gas Incubation System for CO2
89626µ-Plate 96 well, ibiTreat
80326µ-Slide Chemotaxis 3D, ibiTreat
81506µ-Slide Angio-genesis, ibiTreat
81176µ-Dish 35 mm, high Culture-Insert, ibiTreat
7
System podtrzymywania temperatury dostosowany do każdego rodzaju mikroskopu• Łatwy w instalacji i użyciu
• Kompatybilny z wszystkimi modelami mikroskopów odwróconych
• Dokładne i precyzyjne podgrzewanie
• Istnieją dwa rodzaje systemu, które można zamówić w zależności od potrzeb. Dostępna jest również jednostka do inkubacji w odpowiednim stężeniu gazów jako uzupełnienie systemu.
Uniwersalny system podtrzymywania temperatury
• Kompatybilny z wszystkimi modelami mikroskopów odwróconych
Przykładowe zastosowanie:
www.ibidi.com/support/movies
Film ibidi
Uniw
ersalny system
podtrzymyw
ania temperatury
System podtrzymywania temperatury do wielodołkowych płytek
• Odpowiedni do mikroskopów Nikon TI-S-E oraz TI-S-ER ze zmotoryzowanym stolikiem do płytek wielodołkowych (małe powiększenia)
Kontroler temperatury ibidi
Podgrzewana podstawa z szklanym dnem
Podgrzewana, szklana pokrywa dedykowana do płytek wielodołkowych
Płytka wielodołkowa
System podtrzym
ywania tem
pe-ratury do w
ielodołkowych płytek
Kontroler temperatury ibidi
Podgrzewana podstawa do płytek wielokomorowych
Podgrzewana, szklana pokrywa uniwersalna
Podgrzewane inserty do płytek ibidi i innych
System do inkubacji w odpowiednich warunkach CO2 i O2
• Odpowiedni do pracy w różnych warunkach środowiskowych np. hipoksji
System do inkubacjiStacja mieszania
gazówKolumna nawilżająca
+ + +
+ + +
+
NOWOŚĆ: Pomiary tlenu w komórkach i tkankach przy użyciu optycznego systemu pomiarowego ibidi OPAL
ibidi TIP
O2 = 10.4 % O2 = 8.7 %
8
Testy chemotaktyczne
• Kompletne rozwiązanie, począwszy od przygotowania próbki do analizy danych ilościowych
• Pomiary chemotaksji w czasie rzeczywistym• Utrzymywanie stabilnego gradientu do 48 godzin w testach
chemotaktycznych 2D lub 3D• Wiarygodne i niezależne od użytkownika dane
Migracja komórek dendrytycznych
zgodnie z chemotaktycznym
gradientem
Chemotaksja i polaryzacja komórki
linii HT-1080 wybarwionych LifeAct
Mikroskopia
Śledzenie komórek
Przygotowanie próbek
0 min. 10 min. 20 min.
Analizy ilościowe i statystyczne
10-12
10-8
10-4
10 0
War
tość
p(T
est R
ayle
igh)
+/- -/- +/+
0.3
0.2
0.1
0.0
FMI
+/- -/- +/+
Analizy wykresów
Działanie:
Zastosowania:
• Pomiar w warunkach in vitro chemotaksji komórek, które są przyczepione do powierzchni płytki 2D lub 3D osadzonych w żelu
Informacje dot. zamówienia:
Przykłady:
• Polaryzacja komórek
• Molekularne aspekty chemotaksji
• Zbiorowa migracja komórek
• Jednokomórkowa chemotaksja
80306µ-Slide Chemotaxis
2D, ibiTreat
80326µ-Slide Chemotaxis
3D, ibiTreat
80328sticky-Slide Chemotaxis 3D
80316µ-Slide III 3in1, ibiTreat
10918ibidi Heating System, Universal Fit
30003WimTaxis Image Analysis
50201Collagen Type I
1. Posianie komórek w żelowym matriks
2. Uzupełnienie medium pozbawionego chemoatraktantów
3. Uzupełnienie medium chemoatraktantami
C0
C100
1 mm
Komórki w żelu 3D
70 µm
C100 C0
9
Gojenie ran i migracje komórek
• Kompletne rozwiązania do badania gojenia ran wymagające tylko kilku kroków od przygotowania próbki do analizy obrazu
• Duża powtarzalność spowodowana stałą, ściśle zdefiniowaną wielkością szczeliny (rany) - 500 µm, bez wycieków podczas posiewu komórek i bez materiału pozostawionego po usunięciu silikonowego insertu
1. Przymocowanie silikonowego insertu do płaskiej, czystej powierzchni
2. Posianie komórek i czekanie na ich przyczepienie do powierzchni
3. Usunięcie insertu 4. Uzupełnienie medium
5. Obserwacja powstałej szczeliny
Działanie:
Zastosowania:
• Gojenie ran
• Migracje
Wpływ inhibitorów lub wzmacniaczy na proces gojenia ran
Test inwazyjności 2D (Dane pozyskane od C. Matern i K.D. Nnetu, University Leipzig, Niemcy)
600x103
500
400
300
Pow
ierz
chni
a po
kryt
a ko
mór
kam
i [µm
²]
2520151050
Czas [h]
Dodanie leku
Norma
Wzmacniacz
Inhibitor
• Inwazja 2D
• Ko-kultywacja komórek
Mikroskopia
0 h
12 h
24 h
20
25
30
35
15
5
10
0
Kontrola
Inhibitor 1
Inhibitor 2
Wzm
acniacz
1
Wzm
acniacz
2
Prę
dkoś
ć ko
mór
ek[µ
m/h
]
600x10³
500
400
300
Pow
ierz
chni
a po
kryt
a ko
mór
kam
i [µm
²]
2520151050
Czas [h]
Informacje dot. zamówienia:
81176µ-Dish 35 mm, high Culture-Insert, ibiTreat
80241Culture-Insert 24
8020925 Culture-Inserts for Self-Insertion
10918ibidi Heating System, Universal Fit
11920ibidi Gas Incubation System for CO2
30002WimScratch Image Analysis
81156µ-Dish 35 mm, high, ibiTreat
Przygotowanie próbek
Analizy ilościowe i statystyczne
Analizy obrazów
10
Mikroskopia
Analizy obrazów
Analizy ilościowe i statystyczne
Przygotowanie próbekTesty angiogenezy• Kompletne rozwiązania minimalizujące zakres wykonywanych
czynności przygotowania próbki i analizy obrazu
• Obserwacja tworzenia się rurkowatych struktur naczyń krwionośnych
• Doskonała wizualizacja bez powstawania menisku, z rozmieszczeniem wszystkich komórek w jednej płaszczyźnie ogniskowej
• Oszczędność poprzez zminimalizowanie wymaganej ilości żelu do 10 µl na dołek
Porównanie dołków w płytkach IBIDI ze standardowymi płytkami
10x
1)
2)
10x
1)
2)
96 - komorowa mikropłytka1) Płaska powierzchnia na granicy powietrze-
ciecz zapewniająca dobry kontrast na całym obserwowanym obszarze
2) Płaska powierzchnia żelu
Wymagana objętość żelu: 10 µl
Standardowe płytki1) Tworzący się na granicy faz menisk: słaby kontrast
na większości obserwowanego obszaru
2) Menisk tworzący się na powierzchni żelu - problemy ze skupieniem na wszystkich komórkach jednocześnie
Wymagana objętość żelu: 100 µl
Zastosowania:
• Obserwacja formowania naczyń krwionośnych
• Testy kiełkowania naczyń
• Hodowle 3D
• Immunofluorescencja
Przykłady eksperymentów:
2500
2000
1500
1000
500Tu
be
Len
gth
[µ
m/m
m]
]
86420
Time [h]
Inhibitor
Normal
Wpływ inhibitorów na proces formowania struktur rurkowatych w czasie
Informacje dot. zamówienia:
0 h
2 h
6 h
WimTube Key MetricsCovered Area % 36Total Tube Length [px] 12916Total Branching Points 58Total Loops 24Total Nets 1
Tube CharacteristicsTotal Tube Length [px] 12916Total Tubes 98Mean Tube Length [px] 132Std. Dev. Tube Length [px] 82
Loop CharacteristicsTotal Loops 24Mean Loop Area [px] 23809Std. Dev. Loop Area [px] 27614Mean Loop Perimeter [px] 614Std. Dev. Loop Perimeter [px] 427
10x10³
8
6
4
Dłu
gość
stru
ktur
rurk
owat
ych
[µm
/mm
²]
1086420
Czas [h]
8000
6000
4000
2000
0
Dł.
stru
ktur
rurk
owat
ych
[µm
*]*
Dł.
w µ
m /
Stan
dard
owa
pow
ierz
chni
a (=
1 cm
²)
Kontrola
1 ng/ml
10 ng/ml
100 ng/ml
1 µg/ml
10 µg/ml
Koncentracja
81506µ-Slide Angio-genesis, ibiTreat
89646µ-Plate Angio- genesis 96 well, ibiTreat
30001WimTube Image Analysis
30004WimSprout Image Analysis
10918ibidi Heating System, Universal Fit
80826µ-Slide 8 well, ibiTreat
80606µ-Slide VI 0.4, ibiTreat
50051ibidi Anti-Evaporation Oil
11
Testy w warunkach przepływu
• Idealna symulacja różnych warunków fizjologicznych – ruch ciągły jednokierunkowy, oscylacyjny, przepływ pulsacyjny
• Nadaje się do długotrwałego obrazowania żywych komórek
• Minimalna wymagana ilość medium i suplementów
• Dostępne różne rodzaje komór przepływowych
Obrazowanie komórek i analiza immunofluoresencji podczas odpowiedzi na naprężenia ścinające:
Ludzkie komórki śródbłonka żyły pępowinowej HUVEC hodowane w warunkach przepływu na Mikropłytce I 0.4 Luer
Posianie komórek na płytkach kanałowych
Komórki adherentne w warunkach przepływu
24 h
Barwienie i pozyskiwanie obrazów
Ilość
kom
órek
Orientacja
Rodzaje testów: Hodowla komórek w stresie przepływowym
Testy toczenia się i przyczepności
Eksperymenty z zatrzymywaniem przepływu
Zastosowania:
• Kondycjonowanie komórek śródbłonka w przepływie
• Toczenie i adhezja komórek zawieszonych do powierzchni białka
• Zdefiniowana wymiana cieczy
Informacje dot. zamówienia:
Analiza ilościowa
i statystyczna
10902ibidi Pump System
80176µ-Slide I 0.4 Luer, ibiTreat
80666µ-Slide VI 0.1, ibiTreat
80606µ-Slide VI 0.4, ibiTreat
10962Perfusion Set
10802Elbow Luer Connector (and more flow accessories)
10991µ-Galaxy Cell Culture Incubator
10918ibidi Heating System, Universal Fit
Certyfikacja ISO 9001, ISO 13485
Wszystkie produkty ibidi przeznaczone są wyłącznie do celów badawczych!
Błędy i pominięcia w tekście zastrzeżone.
© ibidi GmbH, V3 / 2015 / 04
W celu uzyskania większej ilości informacji odwiedź stronę:
AnimaLab - oficjalny dystrybutor ibidi w Polsce
Tel. +48 61 861 60 04 E. [email protected]
www.animalab.eu
ibidi GmbH
Tel. +49 89 / 520 46 17 - 0 E. [email protected]
www.ibidi.com