Problemy związane z procesami absorpcji, dystrybucji, metabolizmu i wydalania cząsteczek o potencjale leczniczym często prowadzą do uzyskania niekorzystnych wyników na etapie badań klinicznych. Podejmowanie właściwych decyzji dotyczących rodzaju przeprowadzanych testów stanowi kluczowy krok na drodze do efektywnego przeprowadzenia związku od etapu badań podstawowych do fazy klinicznej.

badania przedkliniczne

in vitro

Badania ADME-tox

BioCentrum oferuje wykonanie badań ADME-Tox (z ang. Absorption, Distribution, Metabolism Excretion and Toxicity), których wyniki pozwalają wyselekcjonować najbardziej obiecujące cząsteczki terapeutyczne. Wykonanie testów ADME-Tox gwarantuje zminimalizowanie ryzyka wprowadzenia do fazy badań klinicznych związków nie odpowiada-jących założeniom projektu terapeutycznego lub takich, które wywierają niekorzystny uboczny wpływ na funkcjono-wanie komórki.

Wyznaczenie profilu i określenie poziomu rozpuszczalności związku w różnych rozpusz-

czalnikach jest kluczowym elementem przedklinicznego etapu rozwoju leku. Wodne roz-

twory badanych substancji są poddawane analizie z wykorzystaniem płytek MultiScreen

Solubility filter plate pracujących w układzie próżniowym. Dalsze metody analityczne do-

bierane są pod kątem właściwości badanej substancji. Standardowa procedura wykorzy-

stuje techniki analizy widm UV roztworu substancji. W przypadku prób zanieczyszczonych

stosowane są techniki spektrometrii masowej.

Testy PAMPA (z ang. Parallel Artificial Membrane Permeability Assay) są standardowo wyko-

rzystywane w procesach profilowania właściwości substancji o potencjale leczniczym. Ozna-

czenia wykonywane są z wykorzystaniem płytek MultiScreen-IP PAMPA filter plate. Umożli-

wiają one analizę procesów związanych z transportem badanego związku przez membranę

PVDF pokrytą, w zależności od aplikacji, roztworem substancji lipidowej.

Rozpuszczalność związków

pRzepuszczalność związków (paMpa)

stabilność związków w osoczu i kRwi

Oddziaływania pomiędzy substancją czynną a enzymami obecnymi w osoczu lub ze składni-

kami erytrocytów mogą prowadzić do zmian struktury związku, a co za tym idzie, do zmian

jego właściwości fizykochemicznych. BioCentrum oferuje wydajne metody badania stabilno-

ści substancji wykorzystujące techniki spektrometrii masowej, które pozwalają na przepro-

wadzanie analiz związków preinkubowanych z osoczem lub krwią.

ul. Bobrzyńskiego 14, 30-348 Kraków, Polska tel. +48 12 297 47 20 sprzedaz@biocentrum.com.pl www.biocentrum.com.pl

BioCentrum sp. z o.o.

BioCentrum oferuje dwie wydajne metody badania stabilności metabolicznej związków lecz-

niczych. W jednej wykorzystywane są mikrosomy wątrobowe, które zawierają większość en-

zymów odpowiedzialnych za metabolizm ksenobiotyków. W drugiej metodzie stosowana jest

frakcja S9, zawierająca specyficzny nadsącz uzyskany z homogenatu wątroby. Dzięki zastoso-

waniu wysoce sprawnej chromatografii cieczowej oraz technik spektrometrii masowej możli-

wa jest identyfikacja badanych związków oraz ich metabolitów.

Rodzina cytochromów P450 odgrywa istotną rolę w metabolizmie szerokiej gamy ksenobio-

tyków i związków endogennych. W wyniku interakcji pomiędzy różnymi lekami dochodzi czę-

sto do hamowania metabolizmu, w którym pośredniczą cytochromy P450. Test inhibicji cyto-

chromu P450 pozwala na identyfikację związków charakteryzujących się niskim potencjałem

w oddziaływaniach lek-lek (słabych inhibitorów enzymów). Oznaczenie polega na inkubacji

związku z odpowiednimi substratami poszczególnych izoform enzymu CYP. Test wykorzystuje

rekombinowane enzymy: CYP1A2, CYP2A6, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6,

CYP2E1 i CYP3A4 oraz kilka substratów modelowych. Otrzymana w wyniku oznaczenia war-

tość IC50 określa stężenie badanego związku, przy którym zachodzi 50% inhibicja aktywno-

ści katalitycznej enzymu.

BioCentrum oferuje wykonanie oceny właściwości genotoksycznych (mutagennych), które

stanowią istotny element podczas szacowania bezpieczeństwa stosowania potencjalnych

substancji leczniczych. Zgodnie z wytycznymi OECD TG 471 przeprowadzany jest test

Amesa, który polega na badaniu mutacji powrotnych w komórkach specyficznych szczepów

bakteryjnych.

BioCentrum oferuje szeroki zakres badań cytotoksyczności w hodowlach komórkowych in vitro

wykonywanych w standardach Dobrej Praktyki Laboratoryjnej (DPL), przy użyciu odpowiednich

modeli komórkowych. Przeprowadzane są analizy monitorujące aktywność dehydrogenazy mito-

chondrialnej (testy MTT oraz MTS), ocena poziomu dehydrogenazy mleczanowej w medium ho-

dowlanym (test LDH) oraz ocena tempa proliferacji komórek poprzez ilościową ocenę syntezy

DNA (test BrdU).

W celu oceny wpływu badanych związków na funkcjonowanie komórek BioCentrum oferuje

przeprowadzenie dwóch testów wykonywanych metodą cytometrii przepływowej. Są nimi iden-

tyfikacja zmian apoptotycznych i nekrotycznych w hodowli wybranej linii komórkowej oraz

ocena zmian przebiegu cyklu komórkowego spowodowanych działaniem badanej substancji.

stabilność Metaboliczna

inhiBiCjA CytoChroMu P450

BADAniA genotoksyczności

BADAniA cytotoksyczności

AnAlizA zMiAn APoPtotyCznyCh i nekRotycznych

badania wpływu potencjalnych substancji terapeutycznych na biologię komórki