Diagnostyka dzieci matek zakażonych HIV.

S. Dobosz, M. Marczyńska.

Klinika Chorób Zakaźnych Wieku Dziecięcego AM w WarszawieWojewódzki Szpital Zakaźny w Warszawie, ul. Wolska 37, Oddział XI

Diagnostyka

Pierwsze badania (diagnostyka HIV) – oddział

noworodkowy (do 5-tej doby życia).

Materiał do badań: 1 probówka krwi żylnej 2 - 5 ml (nie może

być krew pępowinowa) sterylnie pobrana, EDTA, transport

do laboratorium w ciągu 24h, temp. pokojowa.

Diagnostyka

Kolejne badania - ośrodki zajmujące się diagnostyką dzieci

matek HIV(+). Równoległa diagnostyka w kierunku wertykalnych

zakażeń HIV, HCV, HBV.

Materiał do badań:

1 probówka (HIV): 2 - 5 ml krew żylna (nie może być

pępowinowa) sterylnie pobrana, EDTA, transport do laboratorium

w ciągu 24h, temp. pokojowa.

2 probówka (HCV): 4 - 5 ml żylna, sterylnie pobrana

na „skrzep”, transport do laboratorium w ciągu 24h, temp. 4o C.

Diagnostyka

Matczyne przeciwciała klasy IgG: przeciwciała anty- HIV do 18 - 24 m.ż.,

przeciwciała anty- HCV do 12 m.ż.

Zakażenie wertykalne badania

wirusologiczne.

Diagnostyka zakażenia HIV u dzieci do 18 - 24 m.ż.

Hodowla wirusa,

oznaczenie HIV- RNA metodą PCR,

oznaczenie antygenu p24 HIV,

ocena wartości limfocytów T CD4+.

Wiek dziecka /badanie

1 - 5 doba życia

10 - 14 doba życia

30 dniżycia

2 - 3 mies.życia

7 mies. życia

> 12 mies. życia

Badanie przedmiotowe

۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷

Neurolog ۷ ۷ ۷

Morfologia krwi obwodowej

۷ ۷ ۷ ۷

Antygen p24, PCR-HIV, hodowla

۷ ۷ ۷

Wartość limf. T CD4

۷ ۷ ۷

HCV-RNA ۷ ۷ ٭۷ ٭۷

AlAT ۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷

Przeciwciała anty-HCV

۷ ٭۷

Przeciwciała anty-HIV

٭۷

Antygen HBs ۷ ۷

HBV-DNA, HBeAg, anty-HBc IgM

٭۷

Diagnostyka zakażenia HIV u dzieci do 18 - 24 m.ż.

Rozpoznanie zakażenia HIV

dwukrotne stwierdzenia obecności

wirusa, testem potwierdzenia może być

ocena replikacji HIV (VL HIV- RNA).

Diagnostyka zakażenia HIV u dzieci do 18 - 24 m.ż.

Wykluczenie zakażenia HIV

dwukrotnie negatywne wyniki badań

wirusologicznych > 30 - go dnia życia

(jedną lub więcej z wyżej wymienionych metod).

Diagnostyka zakażenia HIV u dzieci > 24 m. ż.

Rozpoznanie zakażenia HIV dwukrotne oznaczenie przeciwciał anty-HIV w testach immunoeznymatycznych i potwierdzenie wyniku testem referencyjnym (Western-blot) lub metodami wirusologicznymi.

Diagnostyka wertykalnego zakażenia HCV

Oznaczenie materiału genetycznego wirusa (HCV-RNA) metodą RT-PCR.

Rozpoznanie zakażenia HCV co najmniej dwukrotna obecność HCV- RNA w pierwszym roku życia ( jedno > 6 m. ż.) i/lub obecność przeciwciał anty- HCV u dziecka >12 m. ż.

Wiek dziecka /badanie

1 - 5 doba życia

10 - 14 doba życia

30 dniżycia

2 - 3 mies.życia

7 mies. życia

> 12 mies. życia

Badanie przedmiotowe

۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷

Neurolog ۷ ۷ ۷

Morfologia krwi obwodowej

۷ ۷ ۷ ۷

Antygen p24, PCR-HIV, hodowla

۷ ۷ ۷

Wartość limf. T CD4

۷ ۷ ۷

HCV-RNA ۷ ۷ ٭۷ ٭۷

AlAT ۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷

Przeciwciała anty-HCV

۷ ٭۷

Przeciwciała anty-HIV

٭۷

Antygen HBs ۷ ۷

HBV-DNA, HBeAg, anty-HBc IgM

٭۷

Diagnostyka wertykalnego zakażenia HCV

Obserwacja co najmniej 24 miesięczna (do pełnego wykluczenia zakażenia) wiremia przejściowa, okresowa obecność HCV-RNA w surowicy, brak serokonwersji do anty-HCV.

Przypadki niejasne diagnostycznie - obserwacja wieloletnia, kilkakrotne badania anty- HCV i HCV-RNA w surowicy oraz w mononuklearach krwi obwodowej (PBMC).

Celem pracy jest:

ocena częstości transmisji wertykalnej HCV u dzieci matek zakażonych HIV,

określenie czynników wpływających na ryzyko odmatczynego zakażenia HCV.

Obserwacje własne

Pacjenci i metody:

52 dzieci urodzonych przez 52 matki HIV(+), od czerwca 2001r do września 2005r.

Diagnostyka - niezależnie od posiadanej informacji o zakażeniu HCV u matki.

Pełny schemat badań - 44 dzieci,

7 wypadło z obserwacji, 1 dziecko < 6 mies. życia.

Pacjenci i metody:

Analizowano: przebieg ciąży, rodzaj i czas

trwania porodu, stan dziecka po urodzeniu,

wagę urodzeniową, rodzaj profilaktyki zakażenia

wertykalnego HIV u matki i dziecka.

U 34 kobiet zbadano - poziom wiremii HCVHCV Monitor (Roche) zakres liniowości pomiaru: 6,0x102 - >7,0x105.

Wyniki:

Obecność przeciwciał anty- HCV (1m.ż) stwierdzono u 40/52 dzieci (76,9%) ELISA III generacji (Pointe).

Obecność materiału genetycznego HCV stwierdzono u 7/52 (13,4%) Cobas Amplicor HCV v2.0 (Roche). u jednego - wiremia przejściowa HCV, 6 dzieci - przewlekłe zakażenie HCV.

Zakażenie HIV rozpoznano u 4 dzieci,u żadnego nie rozpoznano współzakażenia HCV.

Wyniki:

U 24/34 kobiet stwierdzono wysoką wiremię HCV

(> 105 kopii/ml).

Stwierdzono statystycznie istotną zależność

pomiędzy transmisją wertykalną HCV a VL HCV

u matki (2(1)=2,70, p<0,05).

Do transmisji wertykalnej HCV doszło u dzieci matek

z wiremią > 105 kopii/ml.

Wiremia HCV (kopii/ml)

1

10

100

1000

10000

100000

1000000

10000000lic

zba

kopi

i w m

l

Badano 34 kobiety

Wyniki: U 10 kobiet - cięcie cesarskie ze wskazań nagłych

(3 dzieci - zakażonych HCV, 1 – HIV).

U 6 kobiet – cięcie cesarskie elektywne (wszystkie dzieci zdrowe).

U 2 kobiet - poród fizjologiczny przedłużony >4h od odejścia wód płodowych (1 dziecko zakażone HCV).

Wykazano statystycznie istotną zależność pomiędzy transmisją HCV a porodem przedłużonym i cięciem cesarskim ze wskazań nagłych (2(1)=5,01, p<0,05).

Wnioski:

Wszystkie dzieci matek zakażonych HIV wymagają

diagnostyki w kierunku wertykalnego zakażenia HCV.

Czynniki ryzyka transmisji wertykalnej HCV:

wysoka wiremia HCV u matki (>105 kopii/ml),

poród fizjologiczny przedłużony >4h od odejścia wód

płodowych,

cięcie cesarskie ze wskazań nagłych.

Diagnostyka wertykalnego zakażenia HBV.

Pierwsza doba życia immunoglobulina

anty-HBs (HBIG) oraz pierwsza dawka

szczepienia przeciwko wzw - B.

Co najmniej dwukrotne oznaczenie HBsAg

(w 2 i 6 m.ż.).

HBsAg (+) HBeAg, anty- HBc IgM,

HBV-DNA, aktywność AlAT.

Wiek dziecka /badanie

1 - 5 doba życia

10 - 14 doba życia

30 dniżycia

2 - 3 mies.życia

7 mies. życia

> 12 mies. życia

Badanie przedmiotowe

۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷

Neurolog ۷ ۷ ۷

Morfologia krwi obwodowej

۷ ۷ ۷ ۷

Antygen p24,PCR-HIV, hodowla

۷ ۷ ۷

Wartość limf. T CD4

۷ ۷ ۷

HCV-RNA ۷ ۷ ٭۷ ٭۷

AlAT ۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷

Przeciwciała anty-HCV

۷ ٭۷

Przeciwciała anty-HIV

٭۷

Antygen HBs ۷ ۷

HBV-DNA, HBeAg, anty-HBc IgM

٭۷

Wiek dziecka /badanie

1 - 5 doba życia

10 - 14 doba życia

30 dniżycia

2 - 3 mies.życia

7 mies. życia

> 12 mies. życia

Badanie przedmiotowe

۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷

Neurolog ۷ ۷ ۷

Morfologia krwi obwodowej

۷ ۷ ۷ ۷

Antygen p24, PCR-HIV, hodowla

۷ ۷ ۷

Wartość limf. T CD4

۷ ۷ ۷

HCV-RNA ۷ ۷ ٭۷ ٭۷

AlAT ۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷

Przeciwciała anty-HCV

۷ ٭۷

Przeciwciała anty-HIV

٭۷

Antygen HBs ۷ ۷

HBV-DNA, HBeAg, anty-HBc IgM

٭۷