UTJEAJ ILJNIH REGULATORA RASTA NA SADRŽAJ …UTJEAJ ILJNIH REGULATORA RASTA NA SADRŽAJ POLIFENOLA...
Transcript of UTJEAJ ILJNIH REGULATORA RASTA NA SADRŽAJ …UTJEAJ ILJNIH REGULATORA RASTA NA SADRŽAJ POLIFENOLA...
UTJECAJ BILJNIH REGULATORA RASTA NA SADRŽAJ POLIFENOLA I ANTIOKSIDACIJSKU AKTIVNOST DUBROVAČKE ZEČINE
Valerija Vujčić 1, Marijana Radić Stojković 2, Sandra Radić Brkanac 1
1Botanički zavod, Biološki odsjek, Prirodoslovno‐matematički fakultet, Sveučilište u Zagrebu, Rooseveltov trg 6, 10000 Zagreb, Hrvatska, 2Zavod za organsku kemiju i biokemiju, Instutut Ruđer Bošković, Bijenička cesta 54, 10000 Zagreb, Hrvatska
TP TF THA TFL TPAN DPPH ABTS
LIST BA+NAA 23,47 b 10,14 c 20,42 b 12,76 b 1,38 a 80,83 c 72,97 a
KALUS BA+NAA 39,10 a 14,29 b 26,56 a 17,58 a 0,33 b 84,99 b 75,87 a
LIST BA+2,4 D 24,07 b 11,22 c 17,45 b 10,51 b 1,34 a 86,22 a 76,95 a
KALUS BA+2,4 D 36,98 a 29,82 a 28,73 a 19,47 a 0,39 b 78,55 d 64,26 b
GA 20 g/L 95,57 99,11
Vrijednosti označavaju srednju vrijednost 3 replike. Statistički značajno različite vrijednosti označene su različitim slovima.
Standarna devijacija uzorka < 5%
Tablica 1. Sadržaj polifenola: ukupnih fenola (TP; mg GAE/g sm), ukupnih flavonoida (TF; mg QE/g sm), ukupnih hidroksicimetnih kiselina (THA;mg CAE/g sm), ukupnih flavonola (TFL; mg QE/g sm) i proantocijanidina (TPAN; mg CE/g sm) te antioksidacijska aktivnost mjerena DPPHmetodom (DPPH; % inhibicije) i ABTS metodom (ABTS; % inhibicije) u etanolnim ekstraktima biljne vrste Centaurea ragusina L.
Dobiveni rezultati ukazuju da biljno tkivo dubrovačke zečine uzgojeno u kulturi tkiva predstavlja dobar izvor polifenola i antioksidanasa koji bi se potencijalno mogli koristiti u liječenju i prevenciji bolesti uzrokovanih slobodnim radikalima.
Biljke dubrovačke zečine uzgojene su u uvjetima in vitro iz sjemenki sakupljenih naprirodnom staništu oko Dubrovnika (Konavoske stijene – lokalitet Pasjača). Sjemenkesu sterilizirane i nasađene na hranjivu podlogu ½MS uz dodatak 0,5 M (BA) i 2,9 Mgiberelinske kiseline (GA3), 3% saharoze i 0,8% agara [3]. Izdanci izolirani iz sjemenkinekoliko su mjeseci subkultivirani na istoj hranjivoj podlozi. Za inicijaciju razvojaizdanaka i kalusa izdanci su presađeni na podloge ½MS BA (2 mg/L) + NAA (0,2 mg/L)i ½MS BA (2 mg/L) + 2,4 D (0,2 mg/L). Listovi i kalusno tkivo nakon 45 dana rasta natestnim podlogama liofilizirani su i usitnjeni u tarioniku uz pomoć tekućeg N2 te suekstrahirani u etanolu (80% v/v). Sadržaj ukupnih fenola (TP) i flavonoida (TF)određen je prema metodi Zhishen i sur. [4] dok je sadržaj ukupnih hidroksicimetnihkiselina i flavonola određen prema metodi Howard i sur. [5]. Sadržaj ukupnihproantocijanidina određen je vanilin-HCl metodom [6]. Antioksidacijska aktivnostekstrakata određena je DPPH [7] i ABTS [8] metodom.
LITERATURA:1.Radić S, Peharec Štefanić P, Lepeduš H, Roje V, Pevalek-Kozlina B. Salt tolerance of Centaurea ragusina L. is associated with efficient osmotic adjustment and increased antioxidative capacity.Environ Exp Bot 2013; 87: 39-48.2.Khammar A, Djeddi S. Pharmacological and Biological Properties of some Centaurea Species. Eur J Sci Res 2012; 84: 398-416.3.Pevalek-Kozlina B. In vitro propagation of Centaurea ragusina L., a Croatian endemic species. Acta Biol Cracov Ser Bot 1998; 40: 21-24.4.Zhishen J, Mengcheng T, Jianming W. The determination of flavonoid contents in mulberry and their scavenging effects on superoxide radicals. Food Chem 1999; 64: 555-559.5.Howard LR, Clark JR, Brownmiller C. Antioxidant capacity and phenolic content in blueberries as affected by genotype and growing season. J Sci Food Agric 2003; 83: 1238-1247.6.Sun B, da-Silva JMR, Spranger I. Critical factors of vanillin assay for catechins and proanthocyanidins. J Agric Food Chem 1998; 46: 4267-4274.7.Germano MP, Pasquale RD, D’Angelo V, Catania S, Silvari V, Costa C. Evaluation of extracts and isolated fraction from Capparis spinosa L. buds as an antioxidant source. J Agric Food Chem2002; 50: 1168–1171.8.Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C. Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay. Free Radic Biol Med 1999; 26: 1231–1237.
Ovo istraživanje je sufinancirala Europska unija: iz Europskog socijalnog fonda u sklopu programa Razvoj
ljudskih potencijala 2007. – 2013. u sklopu projekta “HR.3.2.01-0290 Biološka aktivnost fitokemikalijabiljne vrste Centaurea ragusina L. (BioFitoCen)”
http://www.biofitocen.biol.pmf.hr/
½MS BA + NAA
½MS BA + 2,4 D
Dubrovačka zečina (Centaurea ragusina L.) je zakonom zaštićena i endemična hrvatska biljna vrsta. Naseljava pukotinevapnenačkih stijena koji se uzdižu okomito iznad Jadranskog mora te je prilagođena na uvjete povećane koncentracije solii visokih temperatura [1]. Mediteranska klima u Hrvatskoj pogoduje rastu, često endemičnih, biljnih vrsta s povećanimudjelom sekundarnih metabolita. Vrste roda Centaurea bogate su polifenolima te su dokazana njihova antioksidacijska idruga ljekovita svojstva [2]. Cilj ovog istraživanja je odrediti sadržaj polifenola i antioksidacijsku aktivnost etanolnih (80%)ekstrakata biljne vrste C. ragusina uzgojenih u uvjetima in vitro na podlogama s dodatkom biljnih regulatora rasta -citokinina (BA; benzil-aminopurin) i auksina (NAA; -naftil octena kiselina i 2,4 D; 2,4 diklorfenoksioctena kiselina).
MATERIJALI I METODE
ZAKLJUČAK
REZULTATI
UVOD