Katedra Fizjologii i Patofizjologii Człowieka

Immunologia – Ćwiczenia nr 1 – zajęcia prowadzone zdalnie

Temat: ELISA i ELISPOT

1. Wprowadzenie do zajęć. Omówienie regulaminu zajęć;

2. Test wprowadzający;

3. Opis metod ELISA i ELISPOT.

Część praktyczna:

1. Zasady metod immunoenzymatycznych;

2. Wykonanie testu ELISA przy użyciu aplikacji VIRTUAL LAB;

3. Analiza oryginalnej publikacji badawczej: Orbai A. M., Truedsson L., Sturfelt G., Nved O., Fang H., Alacrón G.,

et. al. Anti-C1q antibodies in systemic lupus erythematosus. 2015. Lupus.;

4. Analiza wyników przykładowego testu ELISA;

5. Wypełnienie kart pracy – praca indywidualna.

Zagadnienia:

Antygeny i ich właściwości, epitopy, hapteny, immunogenny;

Struktura i funkcja przeciwciał, nazewnictwo, cechy łańcuchów zmiennych, cechy łańcuchów stałych, Ig,

neutralizacja specyficzna dla przeciwciał, wartościowość, powinowactwo i awidność przeciwciał;

Reakcja antygen-przeciwciało, kompleksy immunologiczne, stała asocjacji i dysocjacji, przeciwciała

monoklonalne, przeciwciała poliklonalne;

Testy ELISA i ELISPOT – procedury, analiza wyników, zastosowanie.

Materiały:

1. Publikacjanaukowa: Orbai A. M., Truedsson L., Sturfelt G., Nved O., Fang H., Alacrón G., et. al. Anti-C1q

antibodies in systemic lupus erythematosus. 2015. Lupus.;

2. Zasobyinternetowe;

3. “Immunologia” Gołąb J., Jakóbisiak M., Lasek W., Stokłosa T.;

4. „Immunologia” Bryniarski K.

Katedra Fizjologii i Patofizjologii Człowieka

Immunologia – Ćwiczenia nr 2 – zajęcia prowadzone zdalnie

Temat: Cytometria przepływowa

1. Test wprowadzający;

2. Opis metody cytometrii przepływowej;

3. Zasady działania cytometriiprzeływowej;

4. Omówienie podstaw analizy danych w cytometrii przepływowej;

5. Analizaoryginalnejpublikacjinaukowej: Grayson J., Zajac A., Altman J., Ahmed A., Ahmed R. Cutting Edge:

Increased Expression of Bcl-2 in Antigen-Specific Memory CD8+ T Cells. 2014.;

6. Wypełnienie kart pracy – praca indywidualna.

Zagadnienia:

Zagadnienia ćwiczeń nr 1 i nr 2;

Budowa i działanie cytometru przepływowego;

Charakterystyka światła laserowego, zjawisko fluorescencji, detekcja sygnału fluorescencji;

Zasady oceny cytometrii komórkowej, przykłady parametrów mierzonych za pomocą cytometrii

przepływowej;

Rodzaje wykresów wykorzystywanych do prezentacji wyników w metodzie cytometrycznej;

Zastosowania cytometrii przepływowej.

Materiały:

1. Publikacjanaukowa: Grayson J., Zajac A., Altman J., Ahmed A., Ahmed R. Cutting Edge: Increased Expression

of Bcl-2 in Antigen-Specific Memory CD8+ T Cells. 2014.;

2. Zasoby internetowe, baza danych PubMed;

3. “Immunologia” Gołąb J., Jakóbisiak M., Lasek W., Stokłosa T.;

4. „Immunologia” Bryniarski K.;

5. Wprowadzenie do cytometrii przepływowej: przewodnik szkoleniowy;

6. http://www.e-biotechnologia.pl/Artykuly/Cytometria-przeplywowa/

http://www.e-biotechnologia.pl/Artykuly/Cytometria-przeplywowa/

Katedra Fizjologii i Patofizjologii Człowieka

Immunologia – Ćwiczenia nr 3 – zajęcia prowadzone zdalnie

Temat: Metody wykrywania antygenów w badaniach i diagnostyce (ELISA, western blotting,

immunohistochemia, immunofluorescencja)

1. Test wprowadzający;

2. Analizaoryginalnejpublikacjibadawczej: Lucht A., Grunow R., Otterbein C., Mӧller P., Feldmann H., Becker S.

Production of monoclonal antibodies and development of an antygen capture ELISA directed against the

envelope glycoprotein GP of Ebola virus. 2004;

3. Wyszukiwanie informacji na temat metod ELISA, FC, WB, IHC I IFC w internetowej bazie PubMed;

4. Wypełnienie kart pracy – praca indywidualna.

Zagadnienia:

Zagadnienia z poprzednich ćwiczeń;

Western blotting, immunohistochemia, immunofluorescencja, elektroforeza SDS – PAGE – procedury,

metody i zastosowania;

Morfologia i krążenie komórek mieloidalnych i limfoidalnych;

Tworzenie i krążenie komórek limfatycznych;

Populacje i subpopulacje leukocytów we krwi obwodowej. Antygeny powierzchniowe komórek T (TCR, CD3,

CD4, CD8, CD25, CD69, CD62L) i antygeny powierzchniowe komórek B (BCR, CD19, CD20, MHCII). Antygeny

powierzchniowe komórek NK (CD16, CD56).

Materiały:

1. Publikacjanaukowa: Lucht A., Grunow R., Otterbein C., Mӧller P., Feldmann H., Becker S. Production of

monoclonal antibodies and development of an antygen capture ELISA directed against the envelope

glycoprotein GP of Ebola virus. 2004;

2. Zasobyinternetowe;

3. “Immunologia” Gołąb J., Jakóbisiak M., Lasek W., Stokłosa T.;

4. „Immunologia” Bryniarski K.

Katedra Fizjologii i Patofizjologii Człowieka

Immunologia – Ćwiczenia nr 4 – zajęcia prowadzone zdalnie

Temat: Pierwotne niedobory odporności, ich uwarunkowania i diagnoza

1. Test wprowadzający;

2. Pierwotne niedobory odporności;

3. Choroby pierwotnych niedoborów odporności – przykłady;

4. Typy nadwrażliwości I do IV;

5. Analiza tekstu oryginalnej publikacji naukowej: Vilboux et. al. A congenital neutrophil defect syndrome

associated with mutations in VPS45. 2013.;

6. Wypełnienie kart pracy – praca indywidualna.

Zagadnienia:

Zespół Wiskotta-Aldricha;

Niedobór IgA, agammaglobulinemia sprzężona z chromosomem X (XLA);

Zespół hiper-IgM (niedobór CD40);

Pospolity zmienny niedobór odporności (CVID);

Zespół DiGeorge’a;

Ciężkie złożone niedobory odporności (SCID);

Przewlekła choroba ziarniakowa (CGD);

Zespół Chediak’a-Higashiego;

Niedobór adhezji leukocytów;

Niedobory dopełniacza C1 do C9;

ANA (przeciwciała przeciwjądrowe).

Materiały:

1. Publikacja naukowa: Vilboux et. al. A congenital neutrophil defect syndrome associated with mutations in

VPS45. 2013.;

2. Zasoby internetowe, baza danych PubMed;

3. “Immunologia” Gołąb J., Jakóbisiak M., Lasek W., Stokłosa T.;

4. „Immunologia” Bryniarski K.

Katedra Fizjologii i Patofizjologii Człowieka

Immunologia – Ćwiczenia nr 5 – zajęcia prowadzone w sali dydaktycznej

Termin prowadzonych zajęć zostanie podany przez koordynatora przedmiotu

Temat: Wtórne niedobory odporności. Wykrywanie delecji Δ32bp, która określa naturalną odporność na

HIV

1. Test wprowadzający;

2. Izolacja DNA z wymazów;

3. Przygotowanie mieszaniny PCR;

4. Analizatekstuoryginalnejpublikacjinaukowej: Zwoliska K., Knysz B., Rybka K., Pazgan-Simon M.,

Gąsiorowski J., Sobczyński M., Gładysz A., Piasecki E. ProtectiveEffect of CCR5-D32 Against HIV Infection

by the HeterosexualMode of Transmission in a PolishPopulation. 2012.;

5. Wypełnienie kart pracy – praca indywidualna.

Zagadnienia:

Zagadnienia z ćwiczeń 1-2;

Wtórne niedobory odporności. Zespół nabytego niedoboru odporności (AIDS). Inne nabyte niedobory

odporności;

Polimorfizm genu kodującego koreceptor CCR5 dla β-chemokin i jego związek z opornością na zakażenie HIV-

1;

Reakcja PCR (procedura i zastosowanie).

Materiały:

1. Publikacjanaukowa: Zwoliska K., Knysz B., Rybka K., Pazgan-Simon M., Gąsiorowski J., Sobczyński M., Gładysz

A., Piasecki E. ProtectiveEffect of CCR5-D32 Against HIV Infection by the HeterosexualMode of Transmission

in a PolishPopulation. 2012.;

2. Zasoby internetowe, baza danych PubMed;

3. “Immunologia” Gołąb J., Jakóbisiak M., Lasek W., Stokłosa T.;

4. „Immunologia” Bryniarski K.;

5. „Mikrobiologia” Murray P., Rosenthal K., Pfaller M.

Katedra Fizjologii i Patofizjologii Człowieka

Immunologia – Ćwiczenia nr 6– zajęcia prowadzone w sali dydaktycznej

Termin prowadzonych zajęć zostanie podany przez koordynatora przedmiotu

Temat: Immunologia transplantacyjna. Określenie antygenów grup krwi przez traktowanie

przeciwciałami w celu uzyskania aglutynacji

1. Test wprowadzający;

2. Typowanie krwi;

3. Analiza tekstu oryginalnej publikacji naukowej: Soin et al. The use of ABO-incompatible grafts in living donor

liver transplantation – First report from India. 2014.;

4. Wypełnienie kart pracy – praca indywidualna.

Zagadnienia:

Układy grupowe, układ HLA (MHC), rodzaje konfliktów serologicznych;

Immunologia transplantacyjna;

Rodzaje przeszczepów, dobór w zakresie HLA, przeszczepianie komórek krwiotwórczych;

Choroba przeszczep przeciw gospodarzowi(GvHD), reakcja przeszczep przeciwko białaczce (GvL), reakcja

przeszczep przeciwko nowotworowi (GvT);

Tolerancja transplantacyjna.

Materiały:

1. Publikacja naukowa: Soin et al. The use of ABO-incompatible grafts in living donor liver transplantation –

First report from India. 2014.;

2. Zasoby internetowe, baza danych PubMed;

3. “Immunologia” Gołąb J., Jakóbisiak M., Lasek W., Stokłosa T.;

4. „Immunologia” Bryniarski K.

Katedra Fizjologii i Patofizjologii Człowieka

Immunologia – Ćwiczenia nr 7 – zajęcia prowadzone w sali dydaktycznej

Termin prowadzonych zajęć zostanie podany przez koordynatora przedmiotu

Temat: Immunologia chorób zakaźnych

1. W ramach testu: prezentacja studentów na tematy wskazane przez nauczyciela;

2. Część praktyczna: testy na obecność H. pylorii mononukleozy. Budowa i zasada działania testów

komercyjnych, test VDLR, odczyny biologicznie mylne, zjawisko prozony;

3. Analizatekstuoryginalnejpublikacjinaukowej: Rocha L. B., Santos A. R., Munhoz D. D., Cardoso L. T., Luz D.

E., Andreade F. B., Horton D. S., Elias W. P., Piazza R. M. Development of rapid agglutination latex test for

diagnosis of enteropathogenic and enterohemorrhagic Escherichia coli infection in developing world:

defining the biomarker, antibody and method. 2014;

4. Wypełnienie kart pracy – praca indywidualna.

Materiały:

1. Publikacjanaukowa: Rocha L. B., Santos A. R., Munhoz D. D., Cardoso L. T., Luz D. E., Andreade F. B., Horton

D. S., Elias W. P., Piazza R. M. Development of rapid agglutination latex test for diagnosis of

enteropathogenic and enterohemorrhagic Escherichia coli infection in developing world: defining the

biomarker, antibody and method. 2014;

2. Zasoby internetowe, baza danych PubMed;

3. “Immunologia” Gołąb J., Jakóbisiak M., Lasek W., Stokłosa T.;

4. „Immunologia” Bryniarski K.